一步到位,常规PCR也可以做到多重(MultiPlex)扩增!
前段时间小编写了篇基于探针法的一步法多重PCR试剂盒,收到了广大研究者的关注。不少同学给我发私信问,上面是用于real-time PCR的Mixs产品(见上方前情提示),那有没有用于常规PCR(终点法,跑胶)的多重PCR的试剂推荐呢?
Duang Duang,答案是肯定的:5x HOT FIREPol® MultiPlex Mix
5x HOT FIREPol® MultiPlex Mix with 10 mM MgCl2 5x 热启动多重PCR预混Mix(10mM MgCl2) SBD-04-34 不含跑胶的上样染料
5x HOT FIREPol® MultiPlex Mix with 10 mM MgCl2 RTL 5x 热启动多重PCR预混Mix(10mM MgCl2)(直接跑胶) SBD-04-36 内含跑胶的2种上样染料(蓝色与黄色),PCR完之后可直接跑胶。
5x HOT FIREPol® MultiPlex Mix是一种预混即用型解决方案,含有热启动多重PCR所需的所有试剂(客户仅需准备加入:模板,引物和水)。生成的PCR产物与TA克隆程序兼容。
《下面以5x HOT FIREPol® MultiPlex Mix with 10 mM MgCl2 RTL(Ready To Load)为例》
特点:
1.单次反应可以分析多种目标产物(最高可达20个靶标)
2.独家配方,增强灵敏度和产出量
3.有效防止引物二聚体的形成
4.常温放置1个月,酶活性无损失;可在常温条件下配置PCR体系。
推荐的PCR反应体系与PCR程序设置:
如果预期反应体系是50ul,按照*2.5倍的加样量,成比例增加即可。
结果展示:
以人的基因组DNA为模板进行多重PCR,从122bp到1340bp,有效扩增出18个目的片段
想知道有两种loading染料是一种什么样的视觉效果吗?
预混的有色染料不仅视觉上有助于精准上样,还可以在电泳过程中轻松掌握进度:
上知天,下知地,智珠在握:
蓝色染料:对应3.5-4.5 kb DNA 片段;黄色染料:对应35-45 bp DNA
文章来源:每日生物评论
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