高考倒計時31天——高中生物每日一題(微生物的分離與培養考點)
含有限制酶的細胞中通常還具有相應的甲基化酶,這兩種酶對DNA分子有相同的作用序列,但具有不同的催化功能。甲基化酶可以對DNA序列進行修飾,使限制酶不能對這一序列進行識別和切割。回答下列問題:
(1)目前,基因工程中使用的限制酶主要是從______生物中分離純化獲得的。構建“基因組文庫”和“cDNA文庫”的過程中需要使用DNA連接酶的是______(填“基因組文庫”“cDNA文庫”或“基因組文庫和cDNA文庫”)。
(2)含有某種限制酶的細胞,可以利用限制酶切割外源DNA,但不破壞細胞自身的DNA,其原因可能有①______;②______。
(3)利用PCR擴增目的基因的過程由高溫變性(90~95℃)、低溫復性(55~60℃)、適溫延伸(70-75℃)三個步驟構成一個循環,爲使得DNA聚合酶能夠重複利用,選用的酶應在______℃處理後仍然具備催化活性。
(4)在PCR擴增目的基因時,爲實現序列中的腺嘌呤被放射性同位素標記,反應體系中添加的原料應包括鹼基已被標記的______ (填“腺嘌呤核糖核苷酸”、“dATP”或“ATP”)。
12.【答案】原核 基因組文庫和cDNA文庫 細胞自身的DNA分子沒有該限制酶的識別序列 甲基化酶對細胞自身的DNA分子進行了修飾 90-95 dATP
【解析】
解:(1)目前,基因工程中使用的限制酶主要是從原核生物中分離純化獲得的。構建“基因組文庫”和“cDNA文庫”的過程中都需要使用DNA連接酶。
(2)含有某種限制酶的細胞,可以利用限制酶切割外源DNA,但不破壞細胞自身的DNA,其原因可能有:①細胞自身的DNA分子沒有該限制酶的識別序列;②甲基化酶對細胞自身的DNA分子進行了修飾。
(3)PCR技術的過程爲高溫變性(90~95℃)、低溫復性(55~60℃)、適溫延伸(70-75℃),因此爲使得DNA聚合酶能夠重複利用,選用的酶應在90-95℃處理後仍然具備催化活性。
(4)PCR技術的原理是DNA複製,其原理是脫氧核糖核苷酸,因此在PCR擴增目的基因時,爲實現序列中的腺嘌呤被放射性同位素標記,反應體系中添加的原料應包括鹼基已被標記的dATP。
故答案爲: (1)原核 基因組文庫和cDNA文庫
(2)細胞自身的DNA分子沒有該限制酶的識別序列 甲基化酶對細胞自身的DNA分子進行了修飾 (3)90-95 (4)dATP1、關於限制酶,
考生可以從以下幾方面把握: (1)來源:主要從原核生物中分離純化出來。(2)特異性:能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列,並且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。(3)結果:形成黏性末端或平末端。2、PCR技術:(1)概念:PCR全稱爲聚合酶鏈式反應,是一項在生物體外複製特定DNA的核酸合成技術。(2)原理:DNA複製。(3)前提條件:要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物。(4)條件:模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩定DNA聚合酶(Taq酶)(5)過程:①高溫變性:DNA解旋過程(PCR擴增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶,高溫條件下氫鍵可自動解開);低溫復性:引物結合到互補鏈DNA上;③中溫延伸:合成子鏈。本題考查基因工程的相關知識,要求考生識記基因工程的操作工具,掌握各操作工具的功能;識記PCR技術的概念、原理、過程等基礎知識,能結合所學的知識準確答題。
▍本文編輯:生物姐
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