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決定龜類性別的是什麼？

很多龜友都知道決定龜類性別的是溫度，其實這並不完全正確，因爲溫度只是一個誘因，而真正決定龜類性別的是——類固醇。

其中有一篇利用巴西龜作爲實驗材料的文章講解的非常到位，作者闡述了一個決定幼龜性別的模型：孵化溫度引起性腺芳香酶（aromatase）的變化，從而進一步影響性腺發育。

原文呢我就不上了，大家直接看翻譯吧：

脊椎動物性腺的發育過程都大同小異，但引發性腺發育的機制卻迥異。紅耳龜（Trachemys a elegans）是溫度作爲誘因決定性別（TSD），也就是孵化過程中，某一階段（溫度敏感時期）的孵化溫度可以最終決定幼苗的性別。也就是性腺性別是由孵化溫度和激素水平。我們這裏闡述了一個模型：溫度影響芳香酶(aromatase，雌激素合成中的一個催化物)表達水平，從而保障了卵巢的發育。雌激素的分泌促進卵巢發育，同時抑制雄性基因的表達。在雄性孵化溫度，芳香酶表達水平沒有上升，從而保證了睾丸的發育。

紅耳龜性腺發育的過程圖。

最下面stageof development是發育階段。按照孵化在stage 26發生來計算，一個stage的單位應該是兩天。文章中說到紅耳龜的性腺發育可以分爲3個時期，第一個時期bipotential（雙向發展）在stage14-16, 28-32天。由圖中可以看到，這也是溫度敏感時期的開始，這時候性腺開始發育，但是性別還未決定。第二個時期Sexual fate determined (性別決定期),stage16.5/17-19/21,33-40天左右，這時候性腺在不同溫度下，可以向不同性別發展，31度性腺發育成卵巢，26度性腺發育成睾丸。第三個時期sexual differentiation （性別發育期）stage 20/21-hatch，40天左右到孵化，這期間，卵巢睾丸進一步發育成熟階段。

這張圖是原文作者提出的模型。

上面是卵巢(ovary)的發育，下面是睾丸(testis)的發育。在溫度敏感時期開始後，如果是雌性孵化溫度（female-producing temperature）雌性的芳香酶(aromatase)表達量增高(圖中看大概在34天前後)，促進一大堆雌性相關基因（ERalpha/AR, FoxL2, Rspo1, ERbeta）的表達，最後發育出卵巢。芳香酶的上調，同時通過ERalpha這個東東抑制一大堆雄性基因(Sox9, Mis, Dmrt1, Sf1)的表達，從而抑制睾丸的形成。所以根據這個理論模型，34天左右芳香酶的提升，引起一系列變化，從而孵化出雌龜。

證明模型的數據信息

作者測量了不同基因在溫度敏感階段左右的表達水平。上面一半是卵巢發育。下面的是睾丸發育。白色柱表示芳香酶的表達水平。可以看到雌性這邊，stage17之後，芳香酶水平上升明顯。同時雄性這邊，芳香酶沒有表達。

圖中顯示出芳香酶的上調的確是發生在性腺。

上面A，是性腺裏芳香酶的表達水平，虛線是雌性孵化溫度下的，stage17之後，顯著上升。實線是雄性孵化溫度下的，沒變化。上面B是前列腺，腎臟和性腺的混合樣本。雌性雄性在stage23之前基本重疊，說明芳香酶的上調不是大範圍發生的現象。下面更具體一些。深藍色顯示的是芳香酶，明顯分佈在雌性性腺裏（CDE）.雄性裏沒有顯著分佈(FGH)。

溫度的變化，可以誘導芳香酶的水平變化。

爲了更直觀的顯示是溫度的變化引起芳香酶水平變化的，作者在stage17的時候改變了孵化溫度。光看Arom那兩張圖就成了。左邊雄性溫度提升到雌性溫度，芳香酶(深藍染色)上調；右邊雌性溫度下降到雄性溫度，芳香酶表達下調。

由此可見溫度是影響龜類性別的主要誘因，而最關鍵的主導是芳香酶。現在聽我7788講了一大堆，是不是早就忍不住想知道如何解決這個辦法呢？

其實很早之前國外就用letrozole(來曲唑)，發做過來曲唑改變性別的實驗。實驗對象是歐洲澤龜，加藥方法是蛋殼上直接滴加。實驗證明，的確能夠在雌性孵化溫度下孵化出雄龜！只不過加藥時期對幼龜性腺發育很關鍵。如果加藥過晚，甚至有孵化時候有睾丸，但是生長一年後能夠排卵的情況發生。

原文翻譯如下：

關於龜類中的效果，好像主要是法國巴黎大學的Mireille Dorizzi的研究組在90年代後期做的比較多。

得出的結論基本就是在溫度敏感期（temperature-sensitive period）開始時，添加來曲唑，即便在雌性孵化溫度下，幼龜的性腺仍有雄性特徵。

具體結論如下：

1.加藥時間在Stage15.TSP開始前。

由於孵化時間在60-120天不等。所以這個所謂的stage15還是很不好拿捏的。由於出殼期統一定在stage 26，所以stage 15大概是孵化中間靠後的時候。當然不同種龜，這個時間又飄忽不定了。不過晚加不如早加效果明顯，所以可以嘗試在孵化一個月後開始加藥。

2.加藥方法兩種：10微克來曲唑溶解在10微升酒精中，直接滴加到蛋皮上。連續添加4次，每兩天一次。每次滴加的位置都不同，以便達到最大效果；另一種方法比較恐怖。10微克來曲唑溶解在50微升橄欖油中，直接注射到蛋內，一次即可。相信很多人都會選擇第一種方法。

3.來曲唑處理過的龜卵，即便在雌性孵化溫度也有很高比例的雄龜孵化。

這裏有個問題，就是如何判定幼龜的性別。作者是通過解剖幼龜，染色，然後觀察器官的性狀。有睾丸，輸精管結構的，並且卵巢結構退化的，就稱爲雄性特徵的幼龜。但具體具有這樣結構的龜，長大以後，是否真正能具有雄性的功能，原文沒有做這方面的調查。

不過情有可原，有點數據都着急發文章，不可能等個5-6年，看公苗最後到底能不能當爸爸。

圖文來自什麼玩意兒

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