原標題:Hepes buffer是什麼試劑

Hepes buffer是指的HEPES緩衝劑,HEPES就是2-(4-(2-羥乙基)哌嗪)乙磺酸,CAS號7365-45-9。這種緩衝劑通常用於生物化學實驗中,調節反應體系的pH值,像病毒保存液或者細胞保存液中就含有這個成分。

市場上的羥乙基哌嗪乙磺酸HEPES有粉末試劑和溶液試劑兩種類型。HEPES溶液的使用濃度爲10-50mmol/L,一般培養液內含20mmol/LHEPES即可達到緩衝能力。而且這種緩衝液有許多優於磷酸緩衝液的性能,對細胞無毒性作用,能長時間控制恆定的pH範圍,是一種良好的氫離子緩衝劑。

hepes buffer是什麼試劑

hepes buffer的解離常數是7.65(20攝氏度下),pH緩衝範圍是6.6-8.6,一般適用於pH爲6.8-8.2的反應體系。它即可以直接與氫氧化鈉一起直接使用,也可以與鹽混合再用氫氧化鈉調節pH後使用。

一、500ml的1mol/L HEPES,pH爲7.0,stock solution: 稱量0.5摩爾(119.15g)羥乙基哌嗪乙磺酸,再用0.5M~1M的氫氧化鈉調節至所需pH值,最後蒸餾水定容即可,於4攝氏度下密封保存。

加少量鹽的HEPES buffer 500mL: HEPES 6.5g、NaCl 8.0g、Na2HPO4.7H2O 0.198g、用0.5M NaOH 水溶液調節pH值,最後定容並低溫保存。

2×HEPES緩衝鹽溶液的配製:將1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2HPO4.2H2O、0.2g葡聚糖(glucan or dextran)和1g HEPES溶解在90ml的蒸餾水,用0.5M NaOH調節至所需pH值,再用蒸餾水定容至100ml即可。

HEPES的緩衝液體系雖然不如磷酸鹽緩衝液PBS廣泛,但它有更多優點,PBS的離子強度高於HEPES,而離子強度會影響混合溶液中其它溶質的的溶解度。通常PBS能用的地方HEPES可以使用,而使用HEPES的地方PBS通常不能代替。

HEPES緩衝劑與PIPES比較相似,不過PIPES水溶性較差可以製成PIPES鈉鹽。德晟提供的這兩種緩衝劑都是粉末試劑,如果有要求也可以配製成特定濃度的即用型緩衝溶液。

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