血液中丙酮酸的測定：丙酮酸爲糖代謝的中間產物，硫胺素缺乏時，丙酮酸不能氧化而儲留於血液中。正常是爲0.77～1.73mg·100ml-1,缺乏時>1.73 mg·100ml-1。用這個值來評定臨牀的缺乏意義也不大，因缺乏症狀顯著時，血液丙酮酸的能量才增加。故有改用給與葡萄糖與運動後測定血液中的丙酮酸含量。正常人在1小時後，其量達高峯，3h後回到正常值。而硫胺素缺乏時，丙酮酸曲線較高，下落緩慢。

紅細胞轉酮酶活性時（erythrotyte-transketolaseactivity,E-TKA）:E-TKA的測定是評價機體硫胺素營養狀況的有效指標。它是一種表示機體硫胺素營養狀況是否適當的功能試驗，可在硫胺素臨牀缺乏症狀出現前進行診斷，故稱亞臨牀診斷或稱邊緣（maxginal）狀態的檢查。這種方法始於Brin等，在國外已被廣泛應用，成爲常規的方法。我國也開展對該方法的改進研究和應用。結果表明該方法比採用尿中硫胺素排出量的方法以評價機體營養狀況更爲靈敏、準確。

E-TKA的方法的原理及主要步驟簡介如下：哺乳動物的紅細胞中，存在着豐富的TK，它需要焦磷酸胺素（TPP）作爲輔酶。體內的TPP是由攝入的硫胺素經磷酸化後形成的。機體缺乏硫胺素時，TPP減少、TK變成脫輔基的TK。人爲的在體外加入足夠量的TPP到紅細胞溶血液的試管中，使脫輔基TK進入到有活性的TK，比較加與不加TPP、E-TKA的變化情況，可以評價機體硫胺素的營養狀況。

不同實驗室所用的方法雖有不同，但基本步驟相似。其方法是將溶血液樣品放入含有或不含TPP的緩衝液中，再加入過量的核糖-5-磷酸鈉鹽，經30℃保溫30或60分鐘。測定被利用的核糖或生成的景天庚糖或已糖的量。凡因加入TPP而引起酶活性增加，稱爲TPP效應，以%表示。沒有加TPP，所得到的酶活性爲酶的絕對活性，取決於紅細胞中可利用的輔酶量。硫胺素缺乏時可利用的TPP量少，酶絕對活性低，TPP效應%增加。其評價標準見。